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公司产品

  • 日期:2010-01-27
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  • 撰稿人:安徽省血吸虫病防治研究所
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(一)日本血吸虫抗体检测试剂盒(间接血凝法)
    1、产品特点:该产品具备敏感性高、特异性强、稳定性好、操作简便、快速、肉眼判断结果,不需要特殊仪器、价格低廉等特点。
    2、产品用途:本产品可作为临床上日本血吸虫病的辅助诊断方法、血吸虫病流行区确认化疗靶人群的筛查工具以及作为血吸虫病流行病学调查和疫情监测的手段。
    3、主要组成成份
    冻干致敏红细胞、稀释液、阳性对照冻干品、阴性对照冻干品
    4、储存条件及有效期
   
于2~8℃密闭、避光储存,有效期可达2年;稀释后致敏红细胞悬液在2~8℃可稳定2天;稀释液开盖使用后在2~8℃可稳定90天。试剂盒可在常温条件下运输。
    5、适用仪器
移液器、温箱。
    6、样本要求
    血清样本,血清量应不少于25μl。样本若不能及时检测,可在2~8℃保存2~3天,长时间保存应放-20℃以下冰箱冻存。
    7、操作步骤
    (1)配置致敏红细胞悬液:取冻干致敏红细胞1支,加稀释液1ml,充分混匀。
    (2)于血凝板的第1列第1孔加稀释液100μl,第2~4孔加稀释液25μl。再向第1孔加待测血清25μl,充分混匀后吸出25μl于第2孔,第2孔充分混匀后吸出25μl于第3孔,第3孔充分混匀后吸出25μl于第4孔,第4孔充分混匀后弃去25μl,然后在第1孔吸取75μl弃去。第1~4孔血清稀释度分别为1:5、1:10、1:20、1:40。最后向第1~4孔每孔加致敏红细胞悬液25μl,震摇1~2分钟,置37℃下30分钟观察结果。
    (3)每次试验均应设阴性、阳性对照。阴性、阳性对照血清为冻干品,使用前每管加100μl稀释液稀释,充分溶解后使用。
    8、参考值
    以血清稀释度1:10出现阳性反应作为本试剂盒的阳性参考值,被测血清阳性反应稀释度≥1:10者判为阳性。
    9、检验结果的解释
    本试验阳性对照出现阳性反应,阴性对照不出现阳性反应,结果方可成立。凝集反应强度以“-”、“+”、“++”、“+++”表示,以呈“+”凝集的血清最高稀释度作为血清的效价,以效价≥1:10作为阳性判断标准。
    凝集反应强度的判定依据如下:
    阴性反应“-”:红细胞全部下沉在孔底,形成肉眼可见紧密、边缘光滑的小圆点。
    阳性反应:
    “+++”:红细胞形成薄层凝集,布满整个孔底。
    “++”:红细胞形成薄层凝集,面积较“+++”者小。
    “+”:红细胞大部分沉集于孔底,形成一圆点,周围有少量凝集的红细胞,肉眼见周边模糊。
    10、注意事项
    (1)试验过程中,应确保所有器材清洁。微量血凝反应板以96孔“V”型有机玻璃板为适宜。用过的微量血凝反应板不能浸泡于酸、碱溶液中,也不能用毛刷洗擦,必须用高压自来水将沉积孔底的红细胞冲洗干净,再以蒸馏水洗2~3次,晾干备用。急用时可将洗净的反应板置于37℃温箱中烘干。
    (2)待测血清宜用新鲜血清,不能混有红细胞或被细菌污染。样本若不能及时检测,可在2~8℃保存2~3天,长时间保存应放-20℃以下冰箱冻存。
    (3)推荐使用微量移液器(P100)加样,检测不同标本一定要更换移液吸头。
    (4)结果判断的时间与温度有关,温度越高,反应速度越快。在最佳反应温度37℃条件下,30分钟判断结果,在室温下1小时判断结果。
    (5)试剂盒在2~8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。稀释液每次开盖使用后须拧紧瓶盖。

(二)改良加藤法试剂盒
    1、产品应用与特点
    本产品用于常见蠕虫感染及日本血吸虫病病原学诊断;产品具有操作简单,可定量,制片后虫卵不易散失,便于长期保存(薄壳虫卵除外)的特点。 
    2、试剂盒组成 
    塑料定量板、软性塑料刮片、透明液、亲水性透明玻璃纸、尼龙绢片。
    3、操作方法
    (1)编号:每份粪样取3张载玻片进行编号(与待检粪样的编号相同)。 
    (2)打开待检粪样的包装,将尼龙绢片置于待检粪样上,用塑料刮片在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙绢孔上。取过滤后的粪便。 
    (3)将定量板放在载玻片中部,然后把刮片上的细粪渣填入定量板的圆孔内,使其填满全孔并抹平、小心移走定量板,使粪样留在玻片上。 
    (4)取一张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的透明液,盖在粪样上,用一块较厚的载玻片轻压,使粪便均匀地展开于玻璃纸下。 
    (5)将制备好的加藤片放于标本盒内(内垫吸水纸)。 
    (6)置室温25℃、湿度75%时约1小时或30~36℃温箱中约半小时后镜检。 
    (7)镜检:将透明好的加藤片置光学显微镜的载物台上,在低倍镜(10×)下镜检。镜检仔细检查每一个视野,并特别注意与未受精蛔虫卵的鉴定。计数全片血吸虫卵(计数原则:数上不数下,数左不数右)。 
    (8)加藤片的虫卵计数:计算3张加藤片的血吸虫卵数分别为A、B、C,每克粪便虫卵数(EPG)为:(A+B+C) ×8。 
    4、注意事项 
    (1)裁好的玻璃纸要捻开一片片放入透明液中,切忌整叠放入,以免内部浸不透,而影响透明效果;浸泡时间不能少于24小时。 
    (2)粪便过硬时,加少许清水或透明液浸泡片刻,再行刮取。 
    (3)定量板一定要置于载玻片的中部,如果定量板偏于一侧,则制片后玻片边缘的粪膜不能进入镜检视野内而产生漏检。 
    (4)制作标本时,应防止过分干燥,以免虫卵变形或破裂,以致影响虫卵鉴别。 
    (5)粪渣透明的速度取决于温、湿度和粪膜的厚度,一般放置室温即可,冬天则需置温箱中以加快透明。如粪膜过厚,则不易寻找虫卵。

(三)尼龙绢集卵孵化法试剂盒
    1、产品应用与特点 
    本产品用于血吸虫病病原学检查,具有操作时间短、用水量少、劳动强度轻,不需换水等特点。 
    2、试剂盒组成 
    不锈钢筛、锥形尼龙绢袋、夹子、竹筷
    3、操作方法 
将不锈钢筛放在锥形尼龙绢袋上口,把袋子下口卷曲,再用夹子夹牢,用竹筷取被检者粪便约30g放于不锈钢筛内,淋水调浆,使粪液直接滤入尼龙绢袋中。然后移去不锈钢筛,继续淋水冲洗袋内粪渣,直到滤出液变清。将袋子下口放进三角烧瓶内,取下夹子,用淋水冲洗袋内沉渣入三角烧瓶,加水至瓶口1cm处,放入孵化室(箱)或在室温下孵化。经过—定时间后开始观察毛蚴。一般需观察2-3次,观察时间随温度高低而不同。温度高时孵出较早;温度低时毛蚴孵出迟。气温超过30℃时,第1次观察可在0.5-1h后进行,阴性者可在4h后观察第2次,8h后观察第3次,3次均为阴性者,判作阴性结果;气温在26-30℃时,可在孵化后4h开始观察,阴性者8h及12h再观察1次;气温在20-25℃时,则可在8h后观察第1次,12h后观察第2次;如利用自然气温孵化,一昼夜之间的气温悬殊,可在操作后的次晨再观察1次。—般室温在25℃以上时,可利用自然气温孵化,无须加温。 
    4、注意事项 
   (1)粪便必须新鲜,夏季不宜超过12h,冬季不宜超过24h。送的粪量要足,不足30g的退回再送。 
   (2)切勿用包过农药、化肥或其它化学品的纸张包粪便。 
   (3)在城市用自来水作孵化时,一般要将水放在缸内过夜,让其自然脱氯;或在水中加入少量硫代硫酸钠(每50Kg水中,加入硫代硫酸钠0.2-4g0)除去余氯,0.5h后使用。 
   (4)一切用具如烧瓶、不锈钢筛、尼龙绢袋 、夹子 、竹筷等,每次用后都必须洗刷3次,盆中洗刷用水要经常调换。洗净后用60-80 ℃热水浸泡杀卵。尼龙绢袋在每次使用后,需以清水冲洗和将尼龙绢袋正反面多次反复洗刷,以防尼龙绢孔粘有虫卵。然后用80 ℃热水浸泡2-3min,以达到杀卵的目的,避免交叉污染。           
   (5)残余的粪便、粪渣、粪水和沉渣等必须集中在粪桶里,然后倒入指定的沉淀粪池中贮存或用药物杀卵,以防虫卵扩散。  
   (6)用过的尼龙绢袋要经常检查。凡是使用过久,孔目变形或孔目破损者要及时剔除,以免影响效果。
   (7)观察毛蚴时,应将烧瓶向着光源,并衬以黑纸板。要注意毛蚴与水中原生动物的区别。如有怀疑,可用毛细吸管吸出,在显微镜下鉴别。 

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